研究表明仔豬處理液中豬藍(lán)耳病病毒的檢出率更高，且更省時(shí)省力省錢！

PRRS對(duì)美國每年造成的經(jīng)濟(jì)損失超過10億美金，打破傳播循環(huán)，生產(chǎn)PRRSV陰性的斷奶豬是PRRS防控和清除的里程碑。

目前美國在繁殖豬群中監(jiān)測(cè)PRRSV的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)包括每月從30個(gè)隨機(jī)選擇的斷奶仔豬（5頭合成一份）中檢測(cè)血清樣品中的PRRSV RNA（6個(gè)PCR反應(yīng)）。

從仔豬中采集血液十分耗時(shí)，需要兩個(gè)得到良好培訓(xùn)的人員，并會(huì)引起仔豬的應(yīng)激。這些缺點(diǎn)，限制了該方法的使用。

2010年，開始使用口腔液監(jiān)控豬群的健康情況。然后現(xiàn)實(shí)中很難采集哺乳仔豬的口腔液。

因此本文主要探索商品化豬群的處理液采集以及其在PRRSV監(jiān)控中的應(yīng)用。

1、通過將一次性塑料袋放置于干凈的塑料桶中（圖1-1）。

2、然后用一次性紗布（即奶酪布）覆蓋桶的頂部來收集處理液。紗布形成凹陷，用橡皮筋固定于塑料桶上面（圖1-2）。

3、采集仔豬閹割和斷尾的組織，放入紗布，然后將紗布連同組織取下（圖1-3）。

4、 收集處理液（圖1-4），然后將處理液從塑料袋轉(zhuǎn)移到無菌的50毫升錐形離心機(jī)塑料管中（圖1-5）。記錄本次處理液來自哪些仔豬。

圖1  處理液的收集步驟（Lopez et al., 2018）

1、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

從四個(gè)哺乳到斷奶的豬場(chǎng)采集12組樣品，采樣時(shí)間距最近一次PRRS暴發(fā)時(shí)間不等，最長的是27周。每一組樣品包含當(dāng)天所有處理仔豬的處理液。30頭仔豬的血液采集自同一群體的病弱和生長過慢的仔豬，包含雄性和雌性。所有樣品都送到愛荷華州立大學(xué)進(jìn)行常規(guī)的PRRSV的RNA檢測(cè)。對(duì)處理液和血清中PRRSV進(jìn)行測(cè)序。

2、結(jié)果

每一個(gè)實(shí)驗(yàn)組在處理仔豬時(shí)（去勢(shì)和斷尾）時(shí)采集的處理液的體積如表1所示。每一窩的平均的處理液采集量為2.17mL，每頭仔豬的平均采集量是186μL（0.186mL）。

12組處理液樣品中10份為PRRSV陽性（Ct值≥37為陰性）（83.33%），PRRSV陽性樣品的Ct值從22到35不等。對(duì)應(yīng)血清中，只有8份是陽性（66.66%）（每一組血清有一個(gè)血清集合為陽性，就判定對(duì)應(yīng)的組別為PRRSV陽性；每一組包含30頭仔豬，每五份混合為一份）。處理液和血清中PRRSV毒株序列完全相同都為野毒株。

 表2 處理液和對(duì)應(yīng)血清樣品中的PRRSV 定量RT-PCR檢測(cè)結(jié)果，和PRRS暴發(fā)時(shí)間和采樣的間隔時(shí)間及全群免疫M(jìn)LV或者FVE（臨床野毒暴露）的周數(shù)（Lopez et al., 2018）

采集處理液需要十分注意生物安全，不能讓環(huán)境中的物質(zhì)污染處理液。處理液與北美繁殖群標(biāo)準(zhǔn)的PRRSV檢測(cè)方法相比檢出率更高，可能與處理液采樣的群體更大更方便相關(guān)。該方法不僅省時(shí)，還比標(biāo)準(zhǔn)方法省錢。

每個(gè)月進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的血清學(xué)方法檢測(cè)30頭仔豬的血清需要花150美金，對(duì)應(yīng)的處理液可以檢測(cè)6次，涵蓋幾百頭仔豬。另外，一個(gè)2500頭母豬的豬場(chǎng)，每周斷奶1550頭，產(chǎn)活仔數(shù)大概是1650頭，每周用處理液檢測(cè)大概花費(fèi)100美金（每周四個(gè)處理液樣本）。使用北美繁殖群PRRSV檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)每周檢測(cè)同等規(guī)模的豬只的花費(fèi)是8250美金（每5份混合在一起，需要330個(gè)PCR反應(yīng)，每個(gè)25美金）。

無論采取怎樣的采樣策略，更頻繁的檢測(cè)更多的豬只能幫助豬場(chǎng)更敏感的檢測(cè)PRRSV和其他病原。從而幫助豬場(chǎng)盡快檢測(cè)到PRRS的暴發(fā)，在低流行水平檢測(cè)到病原，并進(jìn)行防控。

盡管如此，還需進(jìn)一步評(píng)估處理液檢測(cè)PRRSV和其他病原在豬群水平的敏感性。

1、處理液主要指的是仔豬閹割和斷尾時(shí)的漿液性滲出。臨床條件下，豬場(chǎng)工人能很方便的收集處理液。

2、過收集和監(jiān)測(cè)處理液，能夠更頻繁的檢測(cè)更多的豬只是否感染PRRSV。

3、處理液是疾病檢測(cè)系統(tǒng)的重要提升?？梢栽鲞M(jìn)PRRSV的防控和清除項(xiàng)目的進(jìn)展。

參考文獻(xiàn)

Lopez, W. A., Angulo, J., Zimmerman, J. J., &Linhares, D. C. (2018). Porcine reproductive and respiratory syndromemonitoring in breeding herds using processing fluids. Journal of Swine Healthand Production, 26(3), 146-150. 

編者：陳芳洲（chenfangzhou@webmail.hzau.edu.cn）

審閱：劉愛民博士（liuxx063@umn.edu）