銀杏葉復(fù)方對LPS 應(yīng)激斷奶仔豬小腸黏膜形態(tài)及上皮內(nèi)淋巴細胞和杯狀細胞數(shù)量的影響

引  言

為探討銀杏葉復(fù)方對免疫應(yīng)激斷奶仔豬小腸黏膜形態(tài)及其上皮內(nèi)淋巴細胞（IEL）和杯狀細胞（GC）數(shù)目的影響， 本試驗將36 頭斷奶仔豬隨機分為對照組（灌服110 mL 生理鹽水）、大腸桿菌脂多糖（LPS）應(yīng)激組（灌服110 mL 生理鹽水）、銀杏葉復(fù)方組（灌服110 mL 銀杏葉復(fù)方制劑），每組4 個重復(fù)，每個重復(fù)3 頭。預(yù)試期7 d，正試期27 d。試驗第23 天采用腹膜注射LPS 刺激斷奶仔豬建立免疫應(yīng)激模型。

結(jié)  果

與對照組及LPS 應(yīng)激組相比，銀杏葉復(fù)方顯著提高了斷奶仔豬十二指腸、空腸及回腸段的小腸絨毛高度/ 隱窩深度（P<0.05）；銀杏葉復(fù)方組小腸各段上皮內(nèi)淋巴細胞和杯狀細胞數(shù)量均顯著高于LPS 應(yīng)激組（P<0.05）。綜上，銀杏葉復(fù)方可維持和修復(fù)由免疫應(yīng)激引起的斷奶仔豬腸道損傷并能增強腸道黏膜的免疫功能。

討 論

? 3.1 斷奶仔豬免疫應(yīng)激模型的建立 

LPS 屬于革蘭氏陰性菌細胞壁中的最外層結(jié)構(gòu)，在生理及病理條件下通過胃腸道進入機體內(nèi)，可使機體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，致使機體發(fā)熱，出現(xiàn)采食量下降以及生產(chǎn)性能降低等現(xiàn)象?，F(xiàn)代動物營養(yǎng)免疫學(xué)中常利用LPS 建造斷奶仔豬免疫應(yīng)激模型。本試驗中，LPS 誘導(dǎo)斷奶仔豬產(chǎn)生了一系列細菌感染癥狀，表現(xiàn)為厭食、發(fā)熱、嘔吐腹瀉，這與上述文獻的結(jié)果一致，說明免疫應(yīng)激模型建立成功。本試驗旨在觀察銀杏葉復(fù)方對LPS 應(yīng)激斷奶仔豬小腸黏膜形態(tài)的修復(fù)作用，故在LPS 刺激后4 d 采樣。

? 3.2 銀杏葉復(fù)方對免疫應(yīng)激模型斷奶仔豬腸黏膜形態(tài)的影響 

小腸是動物體消化道中主要吸收營養(yǎng)物質(zhì)的器官，斷奶仔豬受到免疫應(yīng)激引起小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化， 如腸絨毛萎縮、隱窩深度增加、腸道功能的完整性受到破壞，致使其消化吸收功能發(fā)生改變。本試驗中以V/C 衡量小腸消化吸收功能狀態(tài)，若比值升高則表示動物體腸道黏膜及其消化吸收功能有所改善。同時，隱窩深度還反映其腸道上皮細胞的生成率。李焰等研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶肉兔的日糧中添加適量銀杏葉復(fù)方能夠?qū)π∧c黏膜組織起修復(fù)和維持作用。本試驗中，銀杏葉復(fù)方組顯著提高了應(yīng)激型斷奶仔豬小腸段腸絨毛高度以及V/C，除此之外，LPS 應(yīng)激組的十二指腸以及空腸隱窩深度顯著高于銀杏葉復(fù)方組，表明銀杏葉復(fù)方對受損腸道黏膜結(jié)構(gòu)起一定的修復(fù)作用。

? 3.3 銀杏葉復(fù)方對免疫應(yīng)激模型斷奶仔豬腸道內(nèi)IEL 與GC 數(shù)量的影響 

高玉云等報道，腸道細胞的高速增殖、細胞凋亡、上皮細胞和淋巴細胞的更新與斷奶仔豬腸道營養(yǎng)物質(zhì)的利用率和新陳代謝直接相關(guān)。腸道黏膜上皮細胞通過模式識別分子（PRRS）識別病原及其分泌的毒素產(chǎn)生先天性免疫應(yīng)答，是機體天然的機械屏障，腸上皮細胞以緊密連接為主，GC 分泌的黏液組成動物體與外界的一層屏障，是動物機體阻止病原菌入侵的第一道防線。斷奶仔豬受到免疫應(yīng)激后，由于腸上皮細胞構(gòu)成的天然屏障受到破壞，因此修復(fù)腸道上皮細胞成為至關(guān)重要的因素之一。石辛普提出，腸上皮細胞的修復(fù)與更新離不開與其密切相關(guān)的IEL，動物體在受到抗原和病原微生物入侵時，小腸IEL 是機體免疫系統(tǒng)中最先與其斗爭的免疫細胞；石玉祥等研究表明，IEL 數(shù)量不僅可以提示小腸免疫防御功能的完善程度以及局部黏膜免疫屏障的完整性，還能通過調(diào)控相關(guān)細胞因子的方式調(diào)節(jié)上皮細胞和其他淋巴細胞功能。GC 通過分泌黏液而附著在小腸黏膜的表面，起保護腸黏膜作用，GC 還能阻止上皮細胞與毒素直接接觸，通過黏膜表面分泌黏液在機體局部執(zhí)行特異性或者非特異性免疫功能。小腸的腸黏膜形態(tài)和小腸上皮細胞特定結(jié)構(gòu)共同作用形成機體抗感染的重要防線。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，銀杏葉復(fù)方組脾虛性斷奶仔豬十二指腸杯狀細胞數(shù)、空腸和回腸上皮內(nèi)淋巴細胞數(shù)目顯著高于模型組。本試驗中，LPS 應(yīng)激組中的小腸IEL 以及GC 數(shù)量較對照組及銀杏葉復(fù)方組顯著減少，表明銀杏葉復(fù)方可修復(fù)免疫應(yīng)激型斷奶仔豬受損的腸道黏膜屏障。

結(jié)   論

綜上所述，銀杏葉復(fù)方可緩解LPS 造成的免疫應(yīng)激，且能維持并修復(fù)斷奶仔豬腸黏膜形態(tài)，從而改善機體腸道的消化吸收功能，提高生產(chǎn)性能。